Sidee loo go'aamiyaa fiirsashada ugu habboon?
IPTG-ga soo saara (isopropyl-beta-d-thiogalactoside), heerka sare ee fiirsashada, ayaa ka sii wanaagsan. Fiirsashada ugu fiican waxay ku xiran tahay xaaladaha tijaabada ee gaarka ah iyo saameynta kicinta ee la rabo.
Guud ahaan, fiirsashada IPTG waxaa loo isticmaalaa inta u dhaxaysa 0.1-1 mM. Fiirsashada hoose waxay yarayn kartaa saameynta xun ee koritaanka unugyada waxayna yareyn kartaa sunta unugyada sababtoo ah muujinta xad dhaafka ah ee borotiinnada bartilmaameedka ah. Fiirsashada sare waxay sababi kartaa culays xad dhaaf ah oo dheef-shiid kiimikaadka unugyada ah, taasoo saameyn ku yeelanaysa koritaanka unugyada iyo hufnaanta muujinta.
Habka lagu go'aamin karo heerka ugu wanaagsan ee isku-darka waa in la qiimeeyo heerka muujinta borotiinka bartilmaameedka ah iyadoo la sameynayo tijaabooyinka soo-saarista IPTG ee heerar kala duwan. Tijaabooyinka dhaqanka ee heerka yar waxaa lagu sameyn karaa iyadoo la adeegsanayo tiro badan oo ah isku-darka IPTG (tusaale ahaan 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, iwm.) saameynta muujinta ee heerarka kala duwanna waxaa lagu qiimeyn karaa iyadoo la ogaanayo heerka muujinta ee borotiinka bartilmaameedka ah (tusaale ahaan Western blot ama ogaanshaha fluorescence). Sida laga soo xigtay natiijooyinka tijaabada, isku-darka leh saameynta muujinta ugu fiican ayaa loo xushay isu-darka ugu fiican.
Intaa waxaa dheer, waxaad sidoo kale tixraaci kartaa suugaanta khuseeya ama waayo-aragnimada shaybaarrada kale si aad u fahamto heerka uruurinta IPTG ee caadiga ah ee la isticmaalo xaaladaha tijaabada ee la midka ah, ka dibna hagaaji oo u hagaaji sida waafaqsan baahiyaha tijaabada.
Waa muhiim in la ogaado in isku-darka ugu fiican uu kala duwanaan karo iyadoo ku xiran nidaamyada muujinta kala duwan, borotiinnada bartilmaameedka ah, iyo xaaladaha tijaabada ah, sidaa darteed waxaa ugu wanaagsan in kiis-kiis la hagaajiyo.
Waqtiga boostada: Sebteembar-28-2023