4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS:200422-18-0

Saameynta: ONPG waa substrate si gaar ah loogu isticmaalo in lagu ogaado jiritaanka iyo dhaqdhaqaaqa ensaymka β-galactosidase. Marka ensaymka β-galactosidase uu jiro oo firfircoon yahay, wuxuu ONPG u kala qaybiyaa laba badeecood: o-nitrophenol iyo derivative galactose. Xoraynta o-nitrophenol waxay keentaa isbeddel midab jaalle ah, kaas oo lagu cabbiri karo iyadoo la adeegsanayo spectrophotometer.

Codsiga: ONPG waxay leedahay dhowr codsi oo ku saabsan bayoolajiga molecular iyo cilmi-baarista bayoolajiga:

Go'aaminta dhaqdhaqaaqa β-galactosidase: ONPG waxaa badanaa loo isticmaalaa in lagu cabbiro oo lagu cabbiro dhaqdhaqaaqa enzyme-ka β-galactosidase. Heerka sameynta o-nitrophenol, kaas oo si toos ah ugu dhigma dhaqdhaqaaqa enzyme-ka, waxaa lagu cabbiri karaa si sawir-qaade ah.

Muujinta iyo nidaaminta hidda-wadaha: ONPG waxaa badanaa loo isticmaalaa tijaabooyin la xiriira muujinta hidda-wadaha iyo daraasadaha nidaaminta. Waxaa si joogto ah loogu isticmaalaa tijaabooyinka borotiinka isku-dhafka ah, sida nidaamka isku-dhafka lacZ ee caadiga ah loo isticmaalo, si loo barto muujinta hidda-wadaha iyadoo la xakameynayo dhiirrigeliyeyaasha gaarka ah. Waxqabadka beta-galactosidase ee lagu cabbiro ONPG wuxuu bixiyaa aragtiyo ku saabsan heerka muujinta hidda-wadaha.

Baaritaanka dhaqdhaqaaqa β-galactosidase: ONPG waxaa loo isticmaali karaa hab baaritaan midab leh oo ku jira tignoolajiyada DNA-da dib-u-isku-dhafan si loo aqoonsado jiritaanka iyo shaqeynta hidda-wadaha LacZ, kaas oo codeeya β-galactosidase. Habkan baaritaanka wuxuu ka caawiyaa aqoonsashada koollada ka kooban hidda-wadaha xiisaha leh.

Daraasadaha kinetics-ka ensaym-ka: ONPG sidoo kale waxay faa'iido u leedahay barashada kinetics-ka ensaym-ka β-galactosidase. Iyadoo la cabbirayo heerka falcelinta ensaym-ka substrate-ka ee heerarka kala duwan ee substrate-ka, waxaa suurtagal ah in la go'aamiyo xuduudaha kinetic-ga sida joogtada Michaelis-Menten (Km) iyo heerarka falcelinta ugu badan (Vmax).